ПОРІВНЯННЯ 2DІ 3D ПЕРВИННОЇ КУЛЬТУРИ КЛІТИН, ОТРИМАНОЇ З ЕКСПЛАНТАТА НИЗЬКОДИФЕРЕНЦІЙОВАНОГО УРОТЕЛІАЛЬНОГО РАКУ СЕЧОВОГО МІХУРА

Автор(и)

  • Л.В. Гарманчук Київський національний університет імені Тараса Шевченка
  • П.Г. Яковлев Клінічна лікарня “Феофанія”, центра урології та онкоурології, Київ, Україна
  • Г.В. Островська Київський національний університет імені Тараса Шевченка
  • Ю.A. Ступак Київський національний університет імені Тараса Шевченка
  • O.В. Скачкова Національний інститут раку, Київ, Україна
  • O.I. Горбач Національний інститут раку, Київ, Україна
  • Ю.В. Степанов Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького

DOI:

https://doi.org/10.15407/exp-oncology.2023.01.130

Ключові слова:

рак сечового міхура, первинна культура клітин, сфероїди, лактатдегідрогеназа, апоптоз

Анотація

 Вивчення біологічних характеристик раку сечового міхура в первинній культурі є важливим для встановлення діагнозу, визначення прогнозу та вибору схеми персоналізованої терапії. Мета: Охарактеризувати та порівняти 2Dі 3D первинну культуру, отриману з одного зразка пухлинної тканини хворого на низькодиференційований рак сечового міхура. Матеріали та методи: 2Dі 3D первинну культуру отримували з експлантата клітин раку сечового міхура. Визначали метаболізм глюкози, активність лактатдегідрогенази та рівень апоптозу. Результати: Багатоклітинні сфероїди пухлинних клітин (3D) відрізняються від культури2D більшим рівнем споживання глюкози із поживного середовища (в 1,7 рази на 3-ю добу культивування), підвищеною активністю лактатдегідрогенази (збільшується в 2,5 рази на 3-ю добу в 3D культурі та залишається незмінною на 3-ю добу в 2D культурі), більшим закисленням позаклітинного середовища (рН знижується на одиницю в 3D культурі і на 0,5 в 2D культурі). Сфероїди демонструють більшу резистентність до апоптозу (в 1,4 рази). Висновки: Описаний методологічний підхід може бути корисним для характеристики пухлини, а також для оптимізації схем післяопераційного лікування.

Посилання

Habanjar O, Diab-Assaf M, Caldefie-Chezet F, Delort L. 3D cell culture systems: tumor application, advantages, and disadvantages. Int J Mol Sci 2021;22: 12200. doi: 10.3390/ijms222212200

Yoshida T, Okuyama H, Endo H, Inoue M. Spheroid cultures of primary urothelial cancer cells: cancer tissue-originated spheroid (CTOS) method. Methods Mol Biol 2018; 1655:145–153. doi: 10.1007/978-1-4939-7234-0_12

Driehuis E, Kretzschmar K, Clevers H. Establishment of patient-derived cancer organoids for drug-screening applications. Nat Protoc 2020; 15: 3380–3409. doi: 10.1038/s41596-020-0379-4

Nikolaienko TV, Nikulina VV, Shelest DV, et al. The mechanism of VEGF-mediated endothelial cells survival and proliferation in conditions of unfed-culture. Ukr Biochem J 2016; 88: 12–19. doi: 10.15407/ubj88.04.012

Freyer D, Harms C. Kinetic lactate dehydrogenase assay for detection of cell damage in primary neuronal cell cultures. Bio Protoc 2017; 7: e2308. doi: 10.21769/BioProtoc.2308

Wlodkowic D, Skommer J, Darzynkiewicz Z. Flow cytometry-based apoptosis detection. Methods Mol Biol 2009; 559: 19–32. doi: 10.1007/978-1-60327-017-5_2

Amin M. Histological variants of urothelial carcinoma: diagnostic, therapeutic and prognostic implications. Mod Pathol 2009; 22:S96–S118. doi: 10.1038/modpathol.2009.26

Alderson M, Grivas P, Milowsky MI, Wobker SE. Histologic variants of urothelial carcinoma: morphology, molecular features and clinical implications. Bladder Cancer 2020; 6: 107–122. doi: 10.3233/BLC-190257

Hirschhaeuser F, Sattler UG, Mueller-Klieser W. Lactate: a metabolic key player in cancer. Cancer Res 2011; 71: 6921–6925. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-11-1457

Beckert S, Farrahi F, Aslam RS, et al. Lactate stimulates endothelial cell migration. Wound Repair Regen 2006; 14: 321-324.

Corbet C, Feron O. Tumour acidosis: From the passenger to the driver’s seat. Nat Rev Cancer2017; 17: 577–593. doi: 10.1038/nrc.2017.77

White KA, Grillo-Hill BK, Barber DL. Cancer cell behaviors mediated by dysregulated pH dynamics at a glance. J Cell Sci 2017; 130: 663–669. doi:10.1242/jcs.195297

##submission.downloads##

Опубліковано

26.06.2023

Як цитувати

Гарманчук, Л., Яковлев, П., Островська, Г., Ступак, Ю., Скачкова O., Горбач O., & Степанов, Ю. (2023). ПОРІВНЯННЯ 2DІ 3D ПЕРВИННОЇ КУЛЬТУРИ КЛІТИН, ОТРИМАНОЇ З ЕКСПЛАНТАТА НИЗЬКОДИФЕРЕНЦІЙОВАНОГО УРОТЕЛІАЛЬНОГО РАКУ СЕЧОВОГО МІХУРА . Експериментальна онкологія, 45(1), 130–136. https://doi.org/10.15407/exp-oncology.2023.01.130

Номер

Розділ

Методи і прийоми